I.E.S. LA ESTRELLA      DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA Y GEOLOGÍA

OBSERVACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS DE UNA CHARCA

OBJETIVO: Observar los microorganismos de una charca o los de una infusión.

MATERIAL: Microscopio. dos portaobjetos, dos cubreobjetos, infusión, papel de filtro, cuentagotas, pinzas, vaso de precipitados y colorante rojo neutro.

INTRODUCCIÓN:

La obtención de microorganismos (protozoos, algas unicelulares, etc.) se realiza de las siguientes maneras:

1.- Recolección de plancton

El plancton se recoge en el mar, lagos, lagunas y en general en aquellos lugares donde haya una extensión de agua grande. La extracción se realiza con ayuda de una manga, que consiste en una red terminada en un depósito, arrastrada por una embarcación o bien desde la orilla.

Periódicamente (cada 5 minutos más o menos) se vacía el contenido del depósito en un frasco de boca ancha que contiene unos pocos centímetros cúbicos de formol disueltos en la misma agua en la que se está realizando la captura.

Después de varias recolecciones en una misma zona se cierra el frasco y se etiqueta con los siguientes datos: fecha, hora de recogida, temperatura del agua y posición aproximada de la zona.

Una vez en el laboratorio se extrae, con un cuentagotas, un poco de líquido del fondo de los frascos que se vierte en el centro de varios portaobjetos. Después de cubrirlos con los correspondientes cubreobjetos se observará cada preparación al microscopio utilizando primero pequeños aumentos y luego pasando a los de mayor aumento.

2.- Preparación de una infusión

2.1.- En un vaso de precipitados o en un recipiente de unos 300-500 ml. de capacidad se depositan hojas y ramas secas, o en su defecto las hojas desechadas de las lechugas o de cualquier otra verdura de las que venden en las fruterías.

2.2.- Rellenar el vaso de precipitados con agua de charca. Se puede utilizar agua procedente de un grifo, pero en este caso se debe hervir previamente para eliminar el cloro y una vez que se haya enfriado rellenar el vaso de precipitados. Conviene añadir fango y hojas procedentes de un charco para así aumentar la cantidad de materia orgánica.

2.3.- El recipiente, destapado para que se renueve el aire, se deja a la temperatura del laboratorio (20º a 28º) durante una semana aproximadamente.

2.4.- Al cabo de esta semana aparecerán numerosos microorganismos vegetales y animales, fundamentalmente protozoos.

Notas: 1.- Es aconsejable añadir lentejas de agua (Lemma) a la infusión para aumentar las posibilidades de que se vean vorticelas. 2.- Para la posible observación de amebas deja flotando un cubreobjetos, durante 24 horas, sobre la película formada en la superficie de la infusión. Recogerlo con las pinzas y colocarlo sobre un portaobjetos, dejándolo en reposo durante 15 minutos para que las amebas entren en actividad. Se pueden teñir de rojo neutro.

PROTOCOLO

1.- Observación directa

1.1.- Con un cuentagotas tomar unas gotas de líquido de la infusión, procurando que sea de las cercanías de residuos vegetales.

1.2.- Depositar dos o tres gotas en un portaobjetos limpio.

1.3.- Con unas pinzas finas coger una muestra muy pequeña de algún residuo vegetal, en avanzado estado de descomposición, y depositarlo en el mismo portaobjetos utilizado anteriormente.

1.4.- Colocar el cubreobjetos de tal manera que se evite la formación de burbujas.

1.5.- Secar el exceso de agua con ayuda de un trozo de papel de filtro.

1.6.- Observar al microscopio comenzando con el objetivo de menor aumento.

2.- Coloración vital

2.1.- Sobre un portaobjetos limpio realiza una nueva preparación siguiendo las instrucciones marcadas en el punto anterior.

2.2.- Añadir en el borde del cubre una gota de rojo neutro (disolución al 1 x 10.000) esperando que penetre en la preparación muy lentamente. Puede facilitarse la difusión del colorante colocando en el lado opMicroorganismosuesto del cubre, al que se puso la gota de rojo neutro, una tirita de papel de filtro. Al embeber el papel de filtro algo de agua de la preparación, se facilita la penetración del colorante. El rojo neutro, al impregnar muy ligeramente al microorganismo, da mayor contraste a los elementos morfológicos citoplasmáticos.

2.3.- Observar al microscopio comenzando con el objetivo de menor aumento para luego hacerlo con los de mayor aumento.