I.E.S.
LA ESTRELLA DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA Y GEOLOGÍA Observación de la mitosis en células meristemáticas de la raíz de cebolla |
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| Objetivo. Hacer una preparación microscópica de células meristemáticas de la raíz de cebolla para localizar y diferenciar con el microscopio las distintas fases de la mitosis o cariocinesis. |
Material. Cebollas, microscopio, portaobjetos, cubreobjetos,
lanceta, aguja enmangada, pinzas de madera, pinzas de punta fina, palillos,
mechero, tijeras, papel de filtro, vaso de precipitados, vidrio de reloj,
orceína A y orceína B. |
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Introducción (Para realizar este apartado se ha utilizado información procedente del libro Biología de 2º de bachillerato de la editorial SM.) La división celular es el fenómeno citológico por el que una célula origina dos células hijas, cada una de las cuales recibe idéntica información genética. Consta de dos etapas: la cariocinesis o mitosis que asegura el reparto equitativo del material hereditario y la citocinesis o división del citoplasma. El significado biológico de la mitosis es asegurar la conservación del patrimonio hereditario nuclear en el proceso de formación de un individuo adulto a partir de una célula inicial o cigoto. La mitosis consta de las siguientes etapas: profase, metafase, anafase y telofase. Profase. Se produce una condensación de la cromatina, con lo que los cromosomas comienzan a hacerse visibles. Los centríolos, que se han duplicado durante la interfase, comienzan a separarse hasta situarse en polos apuestos de la célula; conforme se separan se forma entre ellos un conjunto de microtúbulos que constituyen el huso acromático o huso mitótico. La membrana nuclear y el nucléolo desaparecen, y los cromosomas se dispersan por el citoplasma. Metafase. Los cromosomas alcanzan el máximo grado de condensación, el huso acromático se ha formado completamente y los cromosomas se sitúan en el plano medio del huso acromático, donde forman la placa ecuatorial o metafásica; la unión entre los cromosomas y los microtúbulos del huso acromático se hace por medio del centrómero. Anafase. Se inicia la separación de las dos cromátidas de cada cromosoma, que emigran hacia polos opuestos. La separación de ambas cromátidas se inicia por el centrómero y de forma sincronizada en todos los cromosomas de la placa metafásica. La anafase termina cuando los cromosomas llegan a los polos. Telofase. Los nucléolos reaparecen y los cromosomas comienzan a descondensarse, con lo que dejan de ser visibles. La membrana nuclear reaparece alrededor de cada grupo de cromosomas, delimitándose así dos zonas nucleares, una en cada polo de la célula. Las membranas se forman a partir del retículo endoplásmico.
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| Protocolo |
Preparación previa. Tres o cuatro días antes de hacer la práctica se pone un bulbo de cebolla
en un vaso de precipitados lleno de agua, de tal manera que la parte
inferior del mismo esté en contacto con el agua. Al cabo de esos tres
o cuatro días se habrán formado numerosas raicillas, cuyos ápices se
utilizarán en esta práctica. Conviene realizar la práctica cuando
las raicillas todavía no han crecido demasiado. |
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| 1. Con una tijera se corta el extremo de varias raicillas, procurando que su longitud sea de unos 2 a 3 mm., ya que es en esta zona de la raíz donde se encuentran las células en división. |
2.
Se depositan los trozos
de raíz en un vidrio de reloj, en el que previamente se han vertido
de 2 a 3 ml de orceína A, cuya función es la de reblandecer las membranas
celulares. |
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3.
Con ayuda de unas pinzas
de madera se calienta el vidrio de reloj a la llama del mechero durante
8 minutos, teniendo gran cuidado de que no entre en ebullición (si es
necesario se retirará el vidrio de reloj para que no se produzca la
ebullición); el calentamiento termina cuando se observa la emisión de
unos tenues vapores. |
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4. Se coge con las pinzas de punta fina uno de los extremos (ápice) de la raíz y se coloca en un portaobjetos añadiendo una gota de orceína B y se deja actuar durante un minuto. La función de la orceína B es la de completar el proceso de teñido de los cromosomas. 5. Hacer un squash:
6. Se observa la preparación con el microscopio empezando con el objetivo de menor aumento para luego utilizar los de mayor aumento. Resultados Dibujar lo observado a través del microscopio, indicando: número de aumentos con lo que se está trabajando, estructuras observadas y etapas de la mitosis que se han visto. Cuestiones 1.
Fotografía obtenida de un ejercicio de las pruebas de acceso a la universidad.
2.
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